分枝杆菌热休克蛋白65重组质粒的构建与原核表达

• 作者: 张会勇 张光谋 张青苗 王雯雯
• 来源期刊: 新乡医学院学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 热休克蛋白 重组质粒 融合蛋白 原核表达 分枝杆菌
• 年，卷（期）: 2016,（12）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 1028-1030,1035
• 分类号: Q813.6
• 语种: 中文
• DOI: 10.7683/xxyxyxb.2016.12.003

摘要

目的 研究分枝杆菌热休克蛋白65(HSP65)重组质粒的构建与原核表达.方法 HSP65的开放阅读框经聚合酶链反应(PCR)扩增后,经Nco Ⅰ与Not Ⅰ内切酶依次酶切,连接至酶切后的原核表达载体PET-28a中,然后将重组质粒转入大肠杆菌BL-21中,PCR筛选阳性克隆,并经DNA测序进一步验证.阳性克隆进一步扩大培养,并进行乳糖诱导,十二烷基磺酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳对菌体蛋白进行检测.结果 成功扩增出1 623 bp的目的片段HSP65;测序结果显示,该片段与目的序列完全相符,重组子PET-28a/HSP65构建成功;乳糖诱导后的HSP65在大肠杆菌中实现高表达.结论 分枝杆菌HSP65蛋白的成功表达,为研究其在抗肿瘤疫苗中的应用奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张会勇	新乡医学院生命科学技术学院	18	75	3.0	8.0
2	张光谋	新乡医学院生命科学技术学院	71	281	9.0	11.0
3	张青苗		2	1	1.0	1.0
4	王雯雯		1	1	1.0	1.0