谷子类受体蛋白激酶基因 SiRLK35的克隆及原核表达

• 作者: 刘炜 李臻 潘教文 王一帆 王庆国
• 来源期刊: 山东农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 谷子 类受体蛋白激酶 SiRLK35 原核表达
• 年，卷（期）: 2016,（9）
• 所属期刊栏目: 生物技术?遗传育种?种质资源
• 页码范围: 1-5
• 页数: 5页
• 分类号: S515+Q78
• 字数: 3453字
• 语种: 中文
• DOI: 10.14083/j.issn.1001-4942.2016.09.001

摘要

本研究以“豫谷1号”cDNA 为模板，通过 PCR 技术获得类受体蛋白激酶基因 SiRLK35（NCBI 登录号：XM＿004956247．2）的全长序列。生物信息学分析显示，该基因编码蛋白由392个氨基酸残基构成，包含一个 S＿TKc 保守结构域以及一个 TFS2N 结构域，含3个跨膜结构域，N 端有信号肽。SiRLK35基因经BamHⅠ、SalⅠ双酶切后，利用 pET －28a 构建原核表达载体，转化大肠杆菌菌株 BL21（DE3），经0．5 mmol／L IPTG 于25℃诱导12 h 后，在44．6 kD 处得到一明显诱导表达蛋白条带，表达产物与预期相符，证明 SiRLK35基因可在大肠杆菌中诱导表达。该结果为进一步研究 SiRLK35基因功能奠定基础。