李斯特菌噬菌体裂解酶CBD蛋白的克隆与表达

• 作者: 刘珊娜 刘金福 范志华 葛怀娜
• 来源期刊: 食品工业科技
• 学科: 工学
• 关键词: 单核细胞增生李斯特菌 噬菌体裂解酶 基因表达 亲和层析
• 年，卷（期）: 2016,（16）
• 所属期刊栏目: 生物工程
• 页码范围: 234-237
• 分类号: TS201.3
• 语种: 中文
• DOI: 10.13386/j.issn1002-0306.2016.16.038

摘要

单核细胞增生李斯特菌噬菌体的裂解酶中细胞壁结合结构域(CBD)能够特异识别李斯特菌细胞.本研究将CBDP40基因扩增后插入pET32a(+)载体,导入大肠杆菌表达系统,获得重组菌株,并对其进行IPTG诱导表达,分析重组蛋白的活性.聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)表明,经0.1 mmol/L IPTG诱导的重组大肠杆菌BL21(DE3)在38 ku处有明显诱导条带,与预期蛋白分子量相符.经过超声细胞破碎,重组蛋白CBDP40分布在上清液中,通过镍离子螯合亲和层析纯化重组蛋白,洗脱后的蛋白浓度为0.908 mg/mL.经菌体结合和间接ELISA验证,重组蛋白CBDP40具有生物学活性,即对李斯特菌具有识别功能.CBD蛋白的重组表达、纯化及其活性验证,为深入研究裂解酶的理化性质和作用机制奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘金福	天津农学院食品科学与生物工程学院	80	742	15.0	23.0
2	范志华	天津农学院食品科学与生物工程学院	22	121	7.0	10.0
3	刘珊娜	天津农学院食品科学与生物工程学院	12	17	3.0	3.0
4	葛怀娜	天津农学院动物科学与动物医院学院	6	44	3.0	6.0