猪ESD真核表达质粒的构建及其抑制口蹄疫病毒复制的研究

• 作者: 刘湘涛 张克山 曹伟军 朱紫祥 李丹 李伟伟 杨帆 郑海学
• 来源期刊: 安徽农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 口蹄疫病毒 酯酶D 抗病毒功能
• 年，卷（期）: 2016,（12）
• 所属期刊栏目: 生物技术
• 页码范围: 117-120
• 页数: 4页
• 分类号: S852.65+1
• 字数: 4749字
• 语种: 中文

摘要

[目的]探究猪ESD蛋白的抗病毒功能,通过构建猪ESD真核表达质粒,研究其是否能够抑制口蹄疫病毒在PK-15细胞中的复制.[方法]从PK-15细胞中提取总RNA,反转录为cDNA,PCR扩增出猪的ESD基因,构建到pcDNATM3.1/Myc-HisA真核表达载体上.通过Western blotting和实时定量PCR检测ESD蛋白的表达情况及其抗病毒功能.[结果]获得了猪ESD真核表达载体,转染后能够正常表达.FMDV感染PK-15细胞后,ESD转录水平显著上调;过表达ESD蛋白显著抑制FMDV的复制;下调表达ESD蛋白显著促进FMDV的复制.[结论]猪ESD蛋白能够抑制FMDV在PK-15细胞中的复制.