猪RIG-I真核表达载体的构建及其抗口蹄疫病毒作用研究

• 作者: 刘磊 曹伟军 朱紫祥 李丹 杨帆 毛箬青 王国庆 郑海学
• 来源期刊: 畜牧兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 口蹄疫病毒 RIG-I 天然免疫 抗病毒作用
• 年，卷（期）: 2015,（4）
• 所属期刊栏目: 预防兽医
• 页码范围: 600-607
• 页数: 8页
• 分类号: S582.659.6
• 字数: 5769字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11843/j.issn.0366-6964.2015.04.013

摘要

为研究模式识别受体分子RIG-I是否具有抑制口蹄疫病毒(FMDV)复制的作用,本研究从猪的PK15细胞中提取RNA,通过分段扩增与融合PCR的方法,扩增猪的RIG-I的完整CDS序列,进一步构建猪RIG-I的真核表达质粒.通过Western blotting和间接免疫荧光试验对构建的真核表达质粒进行表达验证,证明其成功表达,同时证明猪RIG-I蛋白定位于细胞的细胞质中.感染试验发现FMDV能够诱导细胞内RIG-I的转录上调,这表明两者间存在着重要联系.过表达试验证实RIG-I具有抑制FMDV复制的作用,而下调表达RIG-I可以促进FMDV的复制,这表明RIG-I在机体抗口蹄疫病毒感染过程中发挥着重要作用.本研究的开展,为进一步探索RIG-I抗口蹄疫病毒的分子机制提供了理论支持;为口蹄疫病毒感染过程中,天然免疫系统抗病毒机制研究奠定了基础.