猪瘟病毒E0蛋白在PK-15中的表达与鉴定

• 作者: 刘芳冰 周景明 张改平 栗宁 王爱萍 祁艳华
• 来源期刊: 安徽农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 猪瘟病毒 E0蛋白 增强型绿色荧光蛋白 PK-15细胞
• 年，卷（期）: 2016,（10）
• 所属期刊栏目: 生物技术
• 页码范围: 160-162,186
• 页数: 4页
• 分类号: S852.65+1
• 字数: 3341字
• 语种: 中文

摘要

[目的]研究猪瘟病毒(CSFv)E0基因在PK-15细胞中的表达特性.[方法]通过PCR方法克隆了E0基因全长681 bp的片段,连接到真核表达载体pEGFP-C1上,构建出重组质粒并进行双酶切鉴定.[结果]成功构建出重组质粒pEGFP-E0.通过双酶切鉴定,PCR鉴定和测序确定了目的基因大小一致,插入位置完全正确后,利用Lipofecta mine 2000转染试剂盒将重组质粒转染到猪肾细胞PK-15中,转染48 h后在荧光显微镜下观察,可以看到大多数细胞呈现出绿色荧光,说明转染成功.通过G418筛选后,在荧光显微镜下仍能观察到部分细胞能够呈现出绿色荧光,这表明重组融合蛋白pEGFP-E0在PK-15细胞中得到了表达.[结论]获得的能够表达重组融合蛋白的细胞克隆,为进一步大量表达与纯化E0糖蛋白、制备其单抗以及研究猪瘟病毒E0糖蛋白的生物学功能奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王爱萍	郑州大学生命科学学院	48	183	8.0	11.0
2	张改平	郑州大学生命科学学院	20	40	4.0	6.0
4	周景明	郑州大学生命科学学院	33	141	7.0	10.0
5	祁艳华	郑州大学生命科学学院	26	56	5.0	6.0
8	栗宁	郑州大学生命科学学院	5	11	1.0	3.0
9	刘芳冰	郑州大学生命科学学院	1	1	1.0	1.0