建兰花叶病毒RdRp基因的原核表达及多克隆抗体制备

• 作者: 万晴姣 乙引 刘倩 吴正强 李欲轲 洪鲲 龚记熠
• 来源期刊: 植物病理学报
• 学科: 农学
• 关键词: 建兰花叶病毒 RdRp 原核表达 多克隆抗体
• 年，卷（期）: 2017,（3）
• 所属期刊栏目: 细胞生物学、生理学、生物化学、分子生物学
• 页码范围: 333-339
• 页数: 7页
• 分类号: S432.41
• 语种: 中文
• DOI: 10.13926/j.cnki.apps.000102

摘要

采用RT-PCR技术扩增出建兰花叶病毒贵州分离物(CyMV-GZ)的依赖RNA的RNA聚合酶(RNA-dependent RNA polymerase,RdRp)基因保守序列.测序结果表明:该RdRp基因序列长735 bp,编码245个氨基酸残基.构建原核表达载体pET32a(+)-RdRp,将重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),在37℃以0.3 mmol·L-1 IPTG诱导表达分子量约49 kDa重组蛋白.以该重组蛋白为抗原免疫小鼠,制备的抗体效价达1∶204 800.间接ELISA检测显示该多抗与CyMV病叶汁发生特异性免疫反应,而与其他6种同属或不同属病毒叶汁无血清学交叉反应.本实验为进一步研究RdRp的功能以及从分子水平上探讨该病毒的致病机制奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	龚记熠		26	33	4.0	5.0
2	乙引		194	1671	21.0	30.0
3	万晴姣		35	218	9.0	14.0
4	洪鲲		28	116	6.0	9.0
5	刘倩		4	3	1.0	1.0
6	李欲轲		13	17	2.0	3.0
7	吴正强		2	0	0.0	0.0