痢疾志贺菌侵袭素IpaC的原核表达及纯化复性

• 作者: 伦永志 刘顺爱 姚晓坤 孙杰 成军 韩铭
• 来源期刊: 中国微生态学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 侵袭素 IpaC 原核表达 蛋白纯化
• 年，卷（期）: 2017,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 373-376
• 页数: 4页
• 分类号: R378.2
• 语种: 中文
• DOI: 10.13381/j.cnki.cjm.201704001

摘要

目的 为进一步研究痢疾志贺菌侵袭素IpaC蛋白的侵袭活性,必须先获得IpaC重组融合蛋白.方法 将IpaC基因亚克隆至表达载体pET-24α(+)中,转化至E.coli BL21 (DE3)表达宿主菌中,采用IPTG优化诱导表达,然后纯化复性重组蛋白.结果 重组蛋白最佳表达条件为0.50 mmol/L IPTG、30℃诱导6h,获得分子量约为33 kDa的IpaC重组蛋白.Western blotting证实了重组蛋白的特异性.IpaC重组蛋白主要以包涵体形式在宿主菌中表达,通过纯化后得到单一的目的蛋白.结论 成功构建IpaC原核表达体系,并获得了蛋白的高效表达及优化.初步建立了IpaC重组蛋白的纯化方案.为进一步研究IpaC的侵袭性作用奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	成军	首都医科大学附属北京地坛医院传染病研究所	135	496	10.0	17.0
2	孙杰	莆田学院药学与医学技术学院医学检验系	15	7	2.0	2.0
3	伦永志	莆田学院药学与医学技术学院医学检验系	19	22	2.0	4.0
4	刘顺爱	首都医科大学附属北京地坛医院传染病研究所	17	47	3.0	6.0
5	韩铭	首都医科大学附属北京地坛医院传染病研究所	5	1	1.0	1.0
6	姚晓坤	莆田学院药学与医学技术学院医学检验系	4	1	1.0	1.0