重组人普兰林肽原核表达载体的构建及表达

• 作者: 吴红梅 李佳楠 杨薇
• 来源期刊: 江汉大学学报（自然科学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: 普兰林肽 密码子突变 原核表达 诱导表达
• 年，卷（期）: 2017,（1）
• 所属期刊栏目: 医学
• 页码范围: 77-82
• 页数: 6页
• 分类号: Q81
• 字数: 3836字
• 语种: 中文
• DOI: 10.16389/j.cnki.cn42-1737/n.2017.01.013

摘要

目的构建人普兰林肽基因原核表达载体,并诱导其在大肠杆菌中大量高效表达.方法将胰淀素25位的丙氨酸、28位的丝氨酸和29位的丝氨酸用脯氨酸代替,选用大肠杆菌偏爱的密码子对天然胰淀素碱基序列进行修饰,通过化学合成的方式合成了普兰林肽基因片段,经KpnI、HindIII双酶切后插入pET-39b(+)载体,构建pET-39b+[Pramlintide]重组质粒,转化BL21(λDE3)菌株,筛选重组子,并经IPTG诱导重组蛋白表达.结果构建的普兰林肽基因插入载体位置正确,且序列测定结果与预期一致;在37℃条件下,经0.1 mmol/L IPTG诱导后3 h,重组蛋白表达量最高,且重组蛋白主要存在于胞质蛋白中.结论成功构建重组人普兰林肽原核表达载体,并诱导其在大肠杆菌得以表达,为进一步工业化制备普兰林肽奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李佳楠	江汉大学生命科学学院	27	90	5.0	8.0
2	杨薇	江汉大学生命科学学院	4	12	2.0	3.0
6	吴红梅		3	4	1.0	2.0