小鼠pre-miRNA-122启动子荧光素酶报告质粒的构建及表达调控

• 作者: 吴敏丹 吴昊 翟旭光 马梦秋 黄可婷
• 来源期刊: 生物技术
• 学科: 生物学
• 关键词: miRNA-122 报告质粒 血小板衍生生长因子 生物信息学
• 年，卷（期）: 2017,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 211-217
• 页数: 7页
• 分类号: Q786
• 语种: 中文
• DOI: 10.16519/j.cnki.1004-311x.2017.03.0035

摘要

[目的]构建小鼠pre-miRNA-122基因启动子荧光素酶报告质粒,研究血小板衍生生长因子(Platelet-derived growth factor,PDGF)对miRNA-122表达的影响.[方法]利用生物信息学分析pre-miRNA-122启动子片段并扩增,插入pGL3-basic载体中获得报告质粒pmir-122-luc.将pmir-122-luc转染小鼠Huh-7和HepG2细胞,24h后检测荧光素酶活性;同样将其转染小鼠肝星状细胞(Hepatic Stellate Cells,HSCs),PDGF处理12h后检测活性.[结果]pre-miRNA-122上游5.5 ～4.5 kb为启动子区域.构建的质粒经酶切、测序鉴定正确.pmir-122-luc荧光素酶活性较pGL3-basic显著增加,且在Huh-7细胞高表达(24±5.02倍)而在HepG2细胞低表达(1.8-±0.34倍).pmir-122-luc能在HSCs中表达,且PDGF处理后活性降低(P＜0.05).[结论]小鼠pre-miRNA-122启动子荧光素酶活性报告质粒构建成功;PDGF抑制miRNA-122在HSCs中表达,为探索miRNA-122的表达调控机制提供了新的窗口.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	吴昊		36	61	5.0	6.0
2	翟旭光		16	51	4.0	5.0
3	黄可婷		4	10	1.0	3.0
4	吴敏丹		4	10	1.0	3.0
5	马梦秋		2	0	0.0	0.0