克隆、表达和纯化具有生物学活性的巴西诺卡菌P61蛋白

• 作者: 侯雪新 司晨琛 吉兴照 唐璐 孙丽娜 徐帅 李振军 韦超
• 来源期刊: 中国人兽共患病学报
• 学科: 医学
• 关键词: P61 过氧化氢酶 原核表达
• 年，卷（期）: 2017,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 260-263
• 页数: 4页
• 分类号: R378
• 字数: 3126字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-2694.2017.03.013

摘要

目的 构建巴西诺卡菌P61基因原核重组表达载体,在大肠杆菌中表达具有生物活性的P61蛋白,为P61蛋白的进一步相关研究提供实验基础.方法 通过基因合成的方法合成P61基因,将其插入到质粒pET30a(+)载体并导入BL21大肠杆菌,应用IPTG进行诱导表达.通过Western Blot对表达产物进行分析.应用过氧化氢酶检测试剂盒检测其过氧化氢酶活性.结果 P61蛋白在大肠杆菌中可溶性表达,且具有较高的过氧化氢酶活性,能被感染巴西诺卡菌的小鼠血清识别.结论 成功构建了巴西诺卡菌P61蛋白的原核表达质粒,并能在原核表达宿主E.coli BL21中进行高效表达,且表达产物具有过氧化氢酶活性.