利用NusA促溶标签原核表达Butelase 1蛋白

• 作者: 刘起涛 孙士平 朱彦策 王伟杰 郑悦亭 郭婉莹 陈佩格
• 来源期刊: 江西农业学报
• 学科: 生物学
• 关键词: Butelase 1 促溶标签 NusA 表达分析
• 年，卷（期）: 2017,（3）
• 所属期刊栏目: 动物科学
• 页码范围: 115-119
• 页数: 5页
• 分类号: Q786
• 字数: 3989字
• 语种: 中文
• DOI: 10.19386/j.cnki.jxnyxb.2017.03.24

摘要

为获得可溶性Butelase 1蛋白,将Butelase 1基因插入到带有NusA促溶标签的原核表达载体上,将重组质粒转化至大肠杆菌(E.coli) BL21 (DE3)感受态细胞中进行诱导表达,用Ni-NTA亲和层析法纯化表达的可溶性蛋白,用SDS-PAGE和Western blot分析蛋白的表达情况.酶切和测序结果证实pET21b-His6-NusA-Butelase 1原核表达载体构建成功.SDS-PAGE分析结果表明诱导后表达的融合蛋白大小为94.9 kD,主要为可溶性表达,部分为包涵体表达.Western blot检测结果显示,纯化得到的His6-NusA-Butelase 1融合蛋白用抗His6-Tag抗体鉴定时为特异性表达.