家蚕精氨酸激酶原核表达纯化、结构与活性分析

• 作者: 位曙光 何华伟 刘莉娜 王叶菁 蒋文超 赵敏健 赵朋 赵萍
• 来源期刊: 生物工程学报
• 关键词: 家蚕 精氨酸激酶 表达纯化 结构 活性
• 年，卷（期）: 2017,（7）
• 所属期刊栏目: 农业生物技术
• 页码范围: 1109-1123
• 页数: 15页
• 语种: 中文
• DOI: 10.13345/j.cjb.170004

摘要

精氨酸激酶(Arginine kinase,AK)是无脊椎动物体内能量代谢的关键酶,在生长发育、营养利用、免疫抗性、胁迫应答等生命活动过程中发挥着重要的调控作用.家蚕精氨酸激酶BmAK与能量平衡、抗NPV病毒过程相关,但目前关于其分子结构和酶学性质的研究不多.克隆了BmAK基因ORF序列,分析了其染色体定位、基因组结构、mRNA结构、二级结构和三级结构.进化分析表明AK在进化过程中高度保守.原核表达获得了可溶性的BmAK重组蛋白,通过Ni-NTA亲和层析纯化了BmAK.圆二色光谱分析显示BmAK包含α螺旋结构,其α螺旋结构在pH 5-10范围内相对稳定.酶活分析表明BmAK的最适温度为30℃,最适pH为7.5.25℃时BmAK的催化活性最大,在15-30℃范围内,BmAK的结构相对稳定,活性差别不大.BmAK的结构在pH 7.0左右相对稳定.这些研究为揭示BmAK的结构和功能提供了基础,有助于开发以AK为分子靶标的绿色安全环保的新型杀虫剂.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王叶菁	西南大学生物技术学院	5	14	3.0	3.0
2	何华伟	西南大学家蚕基因组生物学国家重点实验室	4	10	2.0	3.0
3	赵敏健	西南大学生物技术学院	1	1	1.0	1.0
4	位曙光	西南大学家蚕基因组生物学国家重点实验室	2	5	1.0	2.0
5	赵朋	西南大学家蚕基因组生物学国家重点实验室	2	5	1.0	2.0
6	蒋文超	西南大学家蚕基因组生物学国家重点实验室	1	1	1.0	1.0
7	刘莉娜	西南大学家蚕基因组生物学国家重点实验室	3	5	1.0	2.0