U6和let-7a作为定量检测miRNAs的内参在大鼠软骨中稳定性的比较

• 作者: 孙健 易林 袁莹 赵益童 郭东贤 郭华 钟楠楠 闵自信 韩燕
• 来源期刊: 西安交通大学学报（医学版）
• 关键词: 软骨 内参 RT-qPCR U6 Let-7a microRNAs(miRNAs)
• 年，卷（期）: 2017,（4）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 497-501,535
• 页数: 6页
• 分类号: R393
• 语种: 中文
• DOI: 10.7652/jdyxb201704006

摘要

目的 比较U6和let-7a两种内参在RT-qPCR方法检测大鼠股骨头软骨样本microRNAs(miRNAs)的稳定性.方法 取软骨生成过程的新生(D0)、断乳(D21)、性成熟(D42)3个时间节点的雌性近交系DA大鼠股骨头软骨,提取总RNA,用RT-qPCR方法分别在U6和let-7a两种内参体系下,检测miR-1、-25、-26a、-140、-146a、-150、-181a、-195、-223、-337等的表达,并与课题组前期获得的二代测序绝对定量结果进行比较,综合评价两种内参的稳定性.结果 在D42样本中U6(P=0.045)、let-7a(P=0.0215)的相对值出现了显著性差异;在两种内参体系中miR-26a、-140、-223、-337的表达趋势相同,miR-1、-146a差异无统计学意义,miR-25、-150、-181a、-195都出现了显著性差异(P＜0.05).综合二代测序绝对定量结果比较,let-7a稳定性优于U6.结论 let-7a稳定性优于U6,更适合做软骨miRNA定量的内参.