海参组织蛋白酶K的部分酶学性质及其对海参自溶的影响

• 作者: 候红漫 周婉茹 孙黎明 季晓彤 年益莹 张元峰 张公亮 王玲 薛鹏
• 来源期刊: 中国农业大学学报
• 学科: 工学
• 关键词: 海参 组织蛋白酶K 酶学特性 自溶
• 年，卷（期）: 2017,（9）
• 页码范围: 72-77
• 页数: 6页
• 分类号: TS254
• 语种: 中文
• DOI: 10.11841/j.issn.1007-4333.2017.09.09

摘要

采用特异性荧光底物法检测海参体壁组织蛋白酶K(CTSK)的酶学性质并初步探讨其对海参自溶的影响.结果表明:CTSK的最适pH为5.0,最适温度为50℃,在20～40℃之间酶活力稳定性较好;Zr2+、Fe2+、Fe3+、Cu2+均对CTSK产生一定抑制作用,抑制率均超过60％;而Ca2 +和Mn2+对其活性影响不大,Mg2+可增强该酶活性、CA-074、Z-Leu-Leu-Leu-H (ZLLL)、碘乙酸、E-64、抗痛素、PMSF对CTSK的抑制率均在85％以上,EDTA和1,10-菲哆啉对该酶的抑制率分别为39.7％和16％,而DTT和L-Cys可将该酶活力分别提高至127.46％和238.3％.在海参匀浆物中分别加入特异性抑制剂CA-074和ZLLL,25℃水浴加热使其发生自溶,并通过SDS-PAGE检测CTSK对海参蛋白降解的影响.结果显示ZLLL能够在一定程度上抑制海参蛋白的降解.CTSK是一种巯基氨基酸含量较高的半胱氨酸蛋白酶,具有一定的金属离子依赖性,但又易被多种金属离子抑制;CTSK有可能直接参与海参自溶过程中蛋白质的降解.