基因组重排筛选高产谷氨酰胺转胺酶菌株

• 作者: 宋佳雯 常忠义 张玉如 步国建 王志珍 田苏 金明飞 高红亮
• 来源期刊: 中国生物工程杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 微生物谷氨酰胺转胺酶(TGase) 基因组重排 茂源链霉菌 高通量筛选
• 年，卷（期）: 2017,（9）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 105-111
• 页数: 7页
• 分类号: Q819
• 语种: 中文
• DOI: 10.13523/j.cb.20170914

摘要

谷氨酰胺转胺酶(TGase)的产量不足的问题一直限制其工业化生产规模,故采用基因组重排的方法,筛选高产谷氨酰胺转胺酶菌株.通过对不同制备条件下原生质体纯度和形成率的考量,获得制备原生质体的最优条件为以6mg/ml的溶菌酶浓度进行酶解,酶解时间2h.再优化融合条件,以2min紫外灭活和40min热灭活结合的方法挑选出融合子.通过两轮基因组重排,经过96孔板发酵高通量筛选和摇瓶发酵复筛验证,获得了一株产酶达7.12U/ml的茂源链霉菌,相比最初选用菌株的平均酶活提高65.5％.发酵结果显示,酶活提高的原因可能是在重组后原酶成熟更快、更彻底,且得到的菌株遗传稳定性良好.证明基因组重排能够有效提高菌株的产酶水平,同时为谷氨酰胺转胺酶产量提高提供理论依据.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	高红亮	华东师范大学生命科学学院	104	863	17.0	23.0
2	常忠义	华东师范大学生命科学学院	91	735	16.0	20.0
3	金明飞	华东师范大学生命科学学院	30	137	6.0	9.0
4	宋佳雯	华东师范大学生命科学学院	2	1	1.0	1.0
5	田苏	华东师范大学生命科学学院	1	1	1.0	1.0
6	王志珍	华东师范大学生命科学学院	1	1	1.0	1.0