芦荟叶皮β-葡萄糖苷酶的分离纯化及酶学性质

• 作者: 唐云明 唐菁 廖海君 李蕊伽 白亚娟 陶敏
• 来源期刊: 西南师范大学学报（自然科学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: 芦荟叶皮 β-葡萄糖苷酶 分离纯化 酶学性质
• 年，卷（期）: 2017,（4）
• 所属期刊栏目: 应用研究
• 页码范围: 53-60
• 页数: 8页
• 分类号: Q946.5
• 字数: 5375字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13718/j.cnki.xsxb.2017.04.009

摘要

库拉索芦荟叶皮经匀浆、 柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液抽提, 硫酸铵分级沉淀, DEAE-Sepharose fast flow层析和Superdex-200 prep grade层析, 获得电泳纯的β-葡萄糖苷酶(β-Glucosidase, BGL). 纯化结果是β-葡萄糖苷酶比活力为98.48 U/mg, 纯化倍数为328.27倍, 酶活性回收率为9.87%, 全酶分子质量约为69.3 kD, 亚基分子质量约为69.7 kD. 酶学性质研究表明: β-葡萄糖苷酶的最适反应温度和最适反应pH值分别为40 ℃和5.0;在20~30 ℃及pH 4.0~8.0范围内稳定性较好;最适条件下, 以pNPG为底物的Km值为2.21 mmol/L,Vmax为1.381 μmol/(min·L). 乙醇,抗坏血酸,Mn2+,K+对该酶活性具有激活作用;SDS,Cu2+对该酶活性具有强烈抑制作用;异丙醇,EDTA,尿素,Mg2+,Li+对该酶活性影响较小;甲醇对该酶有双重作用.