猫免疫缺陷病毒p24基因原核表达载体的构建及表达

• 作者: 潘美乔 王久成 王亚君
• 来源期刊: 黑龙江畜牧兽医（上半月）
• 学科: 农学
• 关键词: 猫免疫缺陷病毒 p24基因 原核表达 包涵体 免疫原性 反应原性
• 年，卷（期）: 2018,（7）
• 所属期刊栏目: 试验研究
• 页码范围: 29-32
• 页数: 4页
• 分类号: S852.6|Q782
• 语种: 中文
• DOI: 10.13881/j.cnki.hljxmsy.2018.03.0146

摘要

为了研究猫免疫缺陷病毒(Feline immunodeficiency virus,FIV)的核衣壳蛋白(corenucleocapsid protein)-p24蛋白的免疫活性,试验根据GenBank中FIV的p24基因序列设计了1对引物,对FIV检测阳性的猫血液样本提取总RNA并进行反转录,PCR扩增p24基因,将此目的片段克隆到原核表达载体pET-28a(+)中,构建获得重组质粒pET-p24,并热转化至E.coli BL21 (DE3)感受态细胞中,诱导蛋白表达后用SDS-PAGE和Western-blot进行鉴定,用FIV感染的猫阳性血清和重组p24蛋白免疫小鼠得到的多克隆抗体对表达蛋白的免疫原性和反应原性进行检测.结果表明:RNA反转录成cDNA后成功扩增出大小为622 bp的p24基因和构建出原核表达载体;构建成功的含pET-p24重组质粒的大肠杆菌诱导后能大量表达FIV-p24蛋白,并且p24蛋白以包涵体形式存在;p24蛋白具有良好的免疫原性和反应原性.说明p24蛋白是具有生物学活性的蛋白,在猫免疫缺陷病的诊断和防治中具有重要意义.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王亚君		22	54	4.0	6.0
2	潘美乔		5	1	1.0	1.0
3	王久成		5	1	1.0	1.0