烟草CYP71基因的克隆与原核优化表达

• 作者: 佟硕秋 吴拥军 贡献 钟杰 高洁
• 来源期刊: 山地农业生物学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 烟草 CYP71 基因克隆 生物信息学分析 原核表达
• 年，卷（期）: 2018,（1）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 12-16
• 页数: 5页
• 分类号: Q78
• 字数: 3099字
• 语种: 中文
• DOI: 10.15958/j.cnki.sdnyswxb.2018.01.003

摘要

本文从烟草中克隆出 CYP71基因,进行生物信息学分析,并在原核细胞中表达出目的蛋白.应用 RT-PCR,从野生型烟草(Nicotiana tabacum)叶片中克隆出一种 CYP450 cDNA 序列(CYP71).序列分析表明,烟草CYP71基因 ORF长为1545 bp,编码514个氨基酸,基因登录号为 KC480444.1.将去除跨膜信号肽及密码子优化后的基因合成后,构建至 pET-30a 表达载体,转化到大肠杆菌 Rosetta (DE3) 中,经 IPTG 诱导和 SDS-PAGE电泳、Western-blot 检测,获得与预期一致的49 KDa 蛋白质,为进一步研究 CYP71基因的抗虫功能奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	吴拥军	贵州大学生命科学学院	62	468	12.0	17.0
2	钟杰	贵州大学生命科学学院	8	9	2.0	3.0
3	佟硕秋	贵州大学生命科学学院	9	5	1.0	2.0
4	高洁	贵州大学生命科学学院	6	22	3.0	4.0
5	贡献	贵州大学生命科学学院	3	4	1.0	2.0