约翰氏不动杆菌冷休克蛋白的多克隆抗体制备

• 作者: 宋杰 张英 李明堂 李萍萍 赵寒冬 黎浩扬
• 来源期刊: 吉林农业大学学报
• 学科: 农学
• 关键词: 冷休克蛋白 融合表达 纯化 Western Blot
• 年，卷（期）: 2018,（5）
• 页码范围: 628-632
• 页数: 5页
• 分类号: S852.43
• 语种: 中文
• DOI: 10.13327/j.jjlau.2018.4369

摘要

构建稳定表达约翰氏不动杆菌2种CspE家族冷休克蛋白(Csp3、Csp4)的原核表达载体,用冷休克蛋白Csp3、Csp4免疫新西兰兔,制备低温条件下约翰氏不动杆菌关键冷休克蛋白的特异性多克隆抗体.利用PCR技术扩增csp3、csp4目的基因片段,回收目的片段克隆至pET32a表达载体,经IPTG诱导表达,利用SDS-PAGE检测融合蛋白的表达情况,使用镍金属作为螯合亲和层析介质纯化融合蛋白,并将其用于免疫新西兰兔,在第4次免疫的2周后采集血清,利用Western Blot检测多克隆抗体的特异性及约翰氏不动杆菌关键冷休克蛋白的表达情况.结果表明:利用目的蛋白作为抗原制备的多克隆抗体能有效检测关键冷休克蛋白Csp3和Csp4的表达情况,可为进一步探究约翰氏不动杆菌在低温条件下关键冷休克蛋白的表达及机制研究奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李明堂	吉林农业大学资源与环境学院	66	394	11.0	16.0
2	张英	吉林大学动物科学学院	56	206	8.0	12.0
3	宋杰	吉林大学动物科学学院	38	131	5.0	11.0
4	李萍萍	吉林大学动物科学学院	4	31	1.0	4.0
5	黎浩扬	吉林大学动物科学学院	1	0	0.0	0.0