人4型腺病毒绿色荧光蛋白报告载体的构建

• 作者: 刘文宽 周志超 周荣 樊晔 田新贵 陈咏 陈诗颖
• 来源期刊: 中华微生物学和免疫学杂志
• 关键词: 人4型腺病毒 载体 加强型绿色荧光蛋白 中和作用
• 年，卷（期）: 2018,（4）
• 所属期刊栏目: 病毒学
• 页码范围: 268-273
• 页数: 6页
• 字数: 3292字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.0254-5101.2018.04.005

摘要

目的 制备人4型腺病毒(Ad4)绿色荧光蛋白(EGFP)报告载体.方法 以我们前期制备的Ad4-GZ01株全基因组载体pBRAd4为基础,用常规分子克隆的方法将基因组E3区缺失并插入EGFP表达框,转染AD293细胞拯救得到重组病毒,测序、电泳和ELISA等方法鉴定,纯化病毒免疫小鼠,ELISA和细胞微量中和试验等方法检测其免疫原性.结果 成功获得携带EGFP报告基因的重组人4型腺病毒rAd4EGFP,其可以被Ad4特异性单抗及抗血清所识别和中和,免疫小鼠可以诱导抗Ad4抗体及抗EGFP特异性抗体.结论 成功制备人4型腺病毒绿色荧光蛋白报告载体,可用于疫苗研发、药物评价、转基因载体等研究.