胞内劳森菌LsaA蛋白的原核表达及间接ELISA抗体检测方法的建立

• 作者: 吴艳阳 常洪涛 李永涛 杨东东 王川庆 赵军 高冬生
• 来源期刊: 畜牧兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 猪增生性肠炎 胞内劳森菌 LsaA蛋白 间接ELISA
• 年，卷（期）: 2018,（4）
• 所属期刊栏目: 预防兽医
• 页码范围: 786-793
• 页数: 8页
• 分类号: S852.61
• 字数: 7406字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11843/j.issn.0366-6964.2018.04.016

摘要

为建立胞内劳森菌特异性抗体检测方法,将密码子优化合成的胞内劳森菌表面蛋白LsaA的编码基因克隆于pET32a(+)载体,在大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达.用纯化的重组LsaA蛋白作为包被抗原,通过一系列条件优化,建立了检测胞内劳森菌抗体的间接ELISA方法.结果显示:该方法可以特异地检测抗胞内劳森菌抗体,与大肠杆菌、猪霍乱沙门菌、猪流行性腹泻病毒和猪传染性胃肠炎病毒等常见猪腹泻病原的抗血清均无交叉反应.来自PCR检测粪便呈胞内劳森菌阳性猪的血清,用所建立ELISA检测均为胞内劳森菌抗体阳性.该方法具有较好的敏感性和重复性,阳性血清经过1:800稀释检测结果仍为阳性,批内和批间重复试验的变异系数分别为0.352％～2.752％和0.877％～3.000％.应用建立的ELISA方法对河南省部分地区猪场胞内劳森菌的感染情况进行了血清流行病学调查,结果显示被检地区猪场均存在不同程度的胞内劳森菌抗体阳性,阳性率在13.3％～57.1％,平均阳性率为30.6％.结果表明,本研究所建立的ELISA方法可以用于胞内劳森菌抗体的检测,为胞内劳森菌感染的监测和流行病学调查提供了方法.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	赵军	河南农业大学牧医工程学院	62	259	9.0	13.0
2	王川庆	河南农业大学牧医工程学院	198	1212	16.0	27.0
3	常洪涛	河南农业大学牧医工程学院	83	312	10.0	13.0
4	李永涛	河南农业大学牧医工程学院	21	43	4.0	5.0
5	高冬生	河南农业大学牧医工程学院	10	29	3.0	4.0
6	杨东东	河南农业大学牧医工程学院	5	15	3.0	3.0
7	吴艳阳	河南农业大学牧医工程学院	4	13	2.0	3.0