核受体相关蛋白1基因慢病毒载体的构建

• 作者: 宋晓斌 徐蛟天 杨智勇 林海 王向鹏 王威 邓兴力 陈孝祥
• 来源期刊: 昆明医科大学学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 核受体相关蛋白1 慢病毒载体 帕金森病
• 年，卷（期）: 2018,（11）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 1-5
• 页数: 5页
• 分类号: Q786
• 字数: 2656字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1003-4706.2018.11.001

摘要

目的 构建使用绿色荧光蛋白(GFP)标记的核受体相关蛋白1(nuclear receptor related 1 protein,Nurr1)慢病毒表达载体(DCE-Nurr1)并鉴定.方法 使用引物设计软件Primier5设计基因Nurr1引物并采用聚合酶链反应(PCR)对其进行扩增,利用XbaI和NotI分别将基因Nurr1和载体pCDH-CMV-MCS-EF1-copGFP进行双酶切,利用T4链接酶将已酶切的基因Nurr1和已酶切的载体pCDH-CMV-MCS-EF1-copGFP连接起来,完成慢病毒表达载体的构建.结果 通过PCR成功地扩增了Nurr1基因并连接到载体pCDH-CMV-MCS-EF1-copGFP上,序列与GenBank登记的序列一致.结论 成功构建DCE-Nurr1慢病毒表达载体,为进一步在体内或体外研究Nurr1基因功能及其对多巴胺神经元的保护作用提供了基础.