来源于Alicyclobacillus sp.A4葡萄糖异构酶的克隆表达及转化应用研究

• 作者: 姚斌 徐波 戴晨霞 曹慧方 柏映国 罗会颖
• 来源期刊: 生物技术通报
• 关键词: 葡萄糖异构酶 高果糖浆 转化率 Alicyclobacillus sp.A4
• 年，卷（期）: 2018,（11）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 144-151
• 页数: 8页
• 语种: 中文
• DOI: 10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2018-0408

摘要

葡萄糖异构酶在体外可以将D-葡萄糖异构化为D-果糖,是商业制备高果糖浆的关键酶.本研究从嗜热菌Alicyclobacillus sp.A4中克隆了葡萄糖异构酶(A4GI)基因,并在大肠杆菌BL21中成功进行了表达.利用His-tag蛋白纯化磁珠对粗酶液进行纯化,并对已纯化的重组A4GI进行详细的酶学性质及转化率的测定.结果表明:A4GI的最适温度和pH分别为65℃和pH 7.5,该酶在pH 6.0-11.0之间很稳定,在pH 6.0-11.0缓冲液中37℃处理1h后,剩余酶活99％以上.最适反应条件下,重组酶对D-葡萄糖的Km与Vmax值为99.8 mM与3.75 μmol/min/mg.在不同浓度的葡萄糖转化实验中,A4GI的转化率在一定底物浓度范围内随底物浓度增加呈现升高的趋势,在底物葡萄糖浓度为3M时达到52.7％的最高转化率,因此可以实现在高浓度葡萄糖下进行高效转化,降低后期浓缩的生产成本,具有较好的工业应用潜力.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	姚斌	中国农业科学院饲料研究所	111	2079	24.0	42.0
2	罗会颖	中国农业科学院饲料研究所	41	299	11.0	16.0
3	柏映国	中国农业科学院饲料研究所	19	198	9.0	14.0
4	徐波	江西农业大学生物科学与工程学院	26	74	6.0	7.0
5	戴晨霞	江西农业大学生物科学与工程学院	2	7	1.0	2.0
7	曹慧方	中国农业科学院饲料研究所	2	0	0.0	0.0