KCTD10基因慢病毒过表达载体的构建及病毒包装

• 作者: 丰昀 周芸羽 张敏 杨倩 王光伟 管海辰 蒋乐龙 黄凤鑫
• 来源期刊: 湖南师范大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: KCTD10基因 过表达 慢病毒载体
• 年，卷（期）: 2018,（2）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 20-23
• 页数: 4页
• 分类号: R3416
• 字数: 2651字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-016X.2018.02.006

摘要

目的:构建KCTD10基因表达载体并包装成病毒颗粒.方法:合成KCTD10基因全长片段,构建pEZ-Lv105-KCTD10载体,转化至大肠杆菌Stbl3中进行筛选.利用PCR及测序鉴定KCTD1-Lv105阳性克隆.将KCTD10-Lv105重组质粒和阳性对照eGFP-Lv105质粒同时与HIV包装质粒混合物共转染于293T细胞进行慢病毒包装,收集浓缩病毒颗粒.将所得病毒颗粒悬浮梯度稀释后感染293T细胞,利用Puromycin进行药筛滴度测定.结果:测序比对检测KCTD10-Lv105重组载体成功构建,荧光显微镜下观察eGFP-Lv105病毒包装成功,药筛检测KCTD10-Lv105浓缩病毒滴度为1.2×108TU/mL.结论:成功包装好过表达KCTD10的慢病毒颗粒,并为进一步研究KCTD10基因在胶质瘤的发生发展中的作用奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	丰昀	长沙市中心医院眼科	16	116	5.0	10.0
2	王光伟	湖南医药学院临床医学院	5	4	1.0	1.0
3	管海辰	湖南医药学院临床医学院	11	11	2.0	3.0
4	蒋乐龙	湖南医药学院临床医学院	5	16	2.0	3.0
5	黄凤鑫	湖南医药学院临床医学院	3	3	1.0	1.0
6	杨倩	湖南医药学院临床医学院	3	3	1.0	1.0
7	周芸羽	湖南医药学院临床医学院	3	3	1.0	1.0
8	张敏	湖南医药学院临床医学院	2	2	1.0	1.0