Primer Extension-DHPLC检测线粒体DNA 12SrRNA常见耳聋相关突变方法的建立

• 作者: 刘亚青 孙晨 戴朴 李琦 田涛 黄正华
• 来源期刊: 听力学及言语疾病杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 线粒体DNA12SrRNA 耳聋 基因突变 变性高效液相色谱 引物延伸
• 年，卷（期）: 2019,（2）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 201-205
• 页数: 5页
• 分类号: R764.44
• 字数: 4999字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1006-7299.2019.02.022

摘要

目的 建立针对线粒体DNA 12SrRNA基因常见耳聋相关突变的Primer Extension-DHPLC(PE-DHPLC)基因诊断新方法.方法 将包含线粒体DNA 12SrRNA 961insC、T1095C、C1494T、A1555G 4种不同突变的4例外周血DNA样本和4例正常对照标本经测序验证,PCR扩增靶序列,设计延伸引物,延伸后得到线粒体DNA 12SrRNA基因961insC、T1095C、C1494T、A1555G 4个常见突变的特异性延伸片段,用全变性高效液相色谱分析延伸片段混合物,分离图谱鉴定被检样本的基因型.结果 4例包含线粒体DNA 12SrRNA基因4种耳聋相关突变的DNA样本均扩增出包含4种突变的975 bp特征性条带,PE-DHPLC检测结果显示突变者有引物峰和突变峰两个峰,完全可以鉴别出4种突变,而4例正常对照标本仅显示单个引物峰.结论 本实验建立了Primer Extension-DHPLC的线粒体相关耳聋突变分析新方法,可用于耳聋的基因诊断.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	戴朴		27	186	8.0	12.0