利用CRISPR/Cas9 敲除人源细胞系中LMNA基因的研究

• 作者: 刘恒 方媚 朱兰玉 李东明 杨芳 舒伟 苏元港 赖乐锦 闫婉云 陆玉双 韦伊 黄月琪
• 来源期刊: 遗传
• 关键词: LMNA 基因 CRISPR/Cas9 293T HepG2 细胞形态
• 年，卷（期）: 2019,（1）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 66-75
• 页数: 10页
• 字数: 6174字
• 语种: 中文
• DOI: 10.16288/j.yczz.18-146

摘要

LMNA 基因编码A 型和C 型核纤层蛋白,参与细胞核核膜的组织,影响基因组稳定性并对细胞分化产生影响.人类肿瘤中LMNA 表达异常普遍存在,其突变造成多种核纤层蛋白病,如Emery-Dreifuss 肌营养不良症(Emery-Dreifuss muscular dystrophy, EDMD)、扩张型心肌病(dilated cardiomyopathy, DCM)和儿童早老症 (Hutchinson-Gliford progeria syndrome, HGPS) 等.为进一步研究LMNA 在细胞内的功能,本研究利用 CRISPR/Cas9 技术对体外培养的293T与HepG2细胞株的LMNA基因进行编辑,获得两株LMNA 基因敲除(LMNA KO)的稳定细胞系.与野生型相比,LMNA KO细胞系增殖能力相对减弱,凋亡增加.同时,细胞形态上也发生显著改变,核膜凹凸不平.本研究首次报道了LMNA KO永生细胞系构建和形态研究结果,为后续LMNA 基因功能研究和致病突变体研究奠定基础.