副干酪乳杆菌β-葡糖苷酶的表达、纯化及酶学性质研究

• 作者: 谢玉锋 路福平 韩雪梅
• 来源期刊: 中国生物工程杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 副干酪乳杆菌 β-葡糖苷酶 纯化 酶学性质
• 年，卷（期）: 2019,（5）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 72-79
• 页数: 8页
• 分类号: Q814
• 语种: 中文
• DOI: 10.13523/j.cb.20190508

摘要

为了实现糖苷类物质的高效转化,将来源于副干酪乳杆菌(Lactobacillus paracasei)TK1501β-葡糖苷酶基因连接于表达载体pET28a(+)上,在E.coli BL21中表达,重组酶经镍离子亲和层析分离得到纯酶,其分子质量和比酶活分别为86.63kDa和675.56U/mg.最适作用温度和pH分别为30℃和6.5.Mg2+和Ca2+对β-葡糖苷酶酶活抑制作用最小,Cu2几乎使其丧失催化活性.其底物特异性较宽泛,对大豆异黄酮、栀子苷、水杨苷、七叶苷、虎杖苷、熊果苷均有降解作用.以β-pNPG为底物时,该酶的Km和Vmax分别为1.44mmol/L和58.32mmol/(L·s),催化系数kcat为3 982/s.结果 与分析表明,来源于副干酪乳杆菌TK1501 β-葡糖苷酶对水解大豆异黄酮和合成糖苷将会发挥重要作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	谢玉锋	省部共建食品营养与安全国家重点实验室天津科技大学生物工程学院	20	52	4.0	6.0
5	韩雪梅	省部共建食品营养与安全国家重点实验室天津科技大学生物工程学院	2	0	0.0	0.0
6	路福平	省部共建食品营养与安全国家重点实验室天津科技大学生物工程学院	2	0	0.0	0.0