CRISPR/dCas9在苜蓿中华根瘤菌中的建立与应用

• 作者: 刘振权 吴香莹 张大伟 董会娜
• 来源期刊: 工业微生物
• 关键词: 维生素B12 Sinorhizobium meliloti CRISPR/dCas9 hemE基因
• 年，卷（期）: 2019,（6）
• 所属期刊栏目: 研究与应用
• 页码范围: 32-38
• 页数: 7页
• 字数: 3750字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-6678.2019.06.005

摘要

本文探讨了CRISPR/dCas9系统对苜蓿中华根瘤菌Sinorhizobium meliloti 320内源hemn基因的弱化效果,以提高其维生素B12的能力.实验首先验证了CRISPR/dCas9系统及CRISPR/dCas9系统不同N20靶向位点在S.meliloti 320中对外源基因gfp的弱化效果.结果 显示,当添加诱导剂1％木糖时,单位OD荧光值降低为对照菌株的34.18％,当N20靶位靠近翻译起始位点时,对结构基因弱化效果明显.进一步探究CRISPR/dCas9对S.meliloti 320中内源的弱化效果发现,在加入终浓度为1％木糖诱导后,hemE基因的转录水平与对照相比下降了28.3％.将henE基因弱化后的工程菌进行摇瓶发酵,其维生素B12产量较对照株提高了9.86％.研究结果显示,hemE基因的弱化有效促进了代谢流引向维生素B12合成,CRISPR/dCas9系统对S.meliloti 320内源结构基因具有较好的弱化效果.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张大伟	大连工业大学食品学院	38	189	7.0	12.0
3	董会娜	中国科学院天津工业生物技术研究所	12	24	3.0	4.0
6	吴香莹	大连工业大学食品学院	2	0	0.0	0.0
10	刘振权	中国科学院天津工业生物技术研究所	1	0	0.0	0.0