山羊AP1M1基因表达分析与多克隆抗体制备

• 作者: 刘太行 王炜 窦露 董小龙 赵永聚
• 来源期刊: 中国兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 山羊 AP1M1 衔接蛋白 睾丸 原核表达
• 年，卷（期）: 2019,（6）
• 所属期刊栏目: 动物科学
• 页码范围: 1220-1226
• 页数: 7页
• 分类号: S814.1
• 语种: 中文
• DOI: 10.16303/j.cnki.1005-4545.2019.06.31

摘要

为深入研究山羊AP1M1(adaptor related protein complex 1 subunit mu 1)在机体生长和繁殖中的作用,采用RT-PCR方法克隆了山羊AP1M1基因,并对其序列和编码蛋白进行分析;构建了pET-30α-AP1M1原核表达载体,免疫实验兔,制备AP1M1基因多克隆抗体;采用qPCR和Western blot检测比较AP1M1在山羊不同组织及睾丸不同发育时期的表达特征.结果 显示,山羊AP1M1基因CDS为1 272 bp,编码423个氨基酸,具有1个Clat-adaptor结构域、1个Adap-comp结构域和5个蛋白质-蛋白质结合位点,在哺乳动物中极为保守.间接ELISA和Western blot结果表明,制备的兔抗pET-30α-AP1M1多克隆抗体效价为1∶128 000,可以与重组蛋白特异性结合.表达模式检测结果显示,AP1M1在成年山羊各组织中均有不同程度的表达,其中在肾脏的表达量最高,其次是睾丸,均极显著高于其他组织(P＜0.01);此外,AP1M1在山羊不同发育时期睾丸组织中均有表达,但在性成熟时显著增加(P＜0.01),体成熟时达到最高.本试验为进一步探索该基因在山羊睾丸中的功能奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王炜	西南大学动物科技学院	15	39	4.0	6.0
2	赵永聚	西南大学动物科技学院	52	224	9.0	12.0
3	刘太行	重庆医科大学基础医学院	3	2	1.0	1.0
4	董小龙	西北农林科技大学动物科技学院	4	0	0.0	0.0
5	窦露	西南大学动物科技学院	1	0	0.0	0.0