EMA-qPCR检测空肠弯曲活菌方法研究

• 作者: 张茂俊 梁昊 段永翔 王佳奇 闻子钰 鞠长燕 顾一心 马艳萍
• 来源期刊: 中国人兽共患病学报
• 学科: 医学
• 关键词: 叠氮溴化乙锭(EMA) 荧光定量PCR(qPCR) 活菌 空肠弯曲菌
• 年，卷（期）: 2019,（9）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 821-825
• 页数: 5页
• 分类号: R378.99
• 字数: 4462字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-2694.2019.00.117

摘要

目的 建立一种快速定量检测食品中"活的"空肠弯曲菌的技术方案.方法 通过对103 CFU/m～106 CFU/mL的空肠弯曲菌进行叠氮溴化乙锭(EMA)的前处理研究,建立区分死菌与活菌的EMA前处理技术,与荧光定量PCR检测弯曲菌的方法相结合,建立EMA-qPCR组合检测技术,并进行模拟食品标本的验证.结果 空肠弯曲菌在103 CFU/mL～106 CFU/mL内,EMA的最优使用浓度为5μg/mL,5μg/mL的EMA-qPCR可区分出死/活空肠弯曲菌混合物中的死菌和活菌,并成功应用于模拟食品标本中"活的"空肠弯曲菌的检测.结论 EMA-qPCR可作为快速定量检测样本中"活的"空肠弯曲菌的方法.