脑心肌炎病毒衣壳蛋白VP3真核表达载体pCMV-HA-VP3的构建及融合表达

• 作者: 冯若飞 李倩 李向茸 李生军 王兴陇 马瑞仙
• 来源期刊: 中国兽医科学
• 学科: 农学
• 关键词: 脑心肌炎病毒 VP3基因 真核表达载体 HA标签
• 年，卷（期）: 2019,（2）
• 所属期刊栏目: 预防兽医学
• 页码范围: 226-233
• 页数: 8页
• 分类号: S852.659.6
• 语种: 中文
• DOI: 10.16656/j.issn.1673-4696.2019.0031

摘要

为构建脑心肌炎病毒(EMCV)衣壳蛋白VP3的真核表达载体pCMV-HA-VP3,以期实现其在HEK293、BHK21及HeLa这三种不同细胞中的表达.提取脑心肌炎病毒RNA,通过RT-PCR、酶切与连接等方法构建重组质粒pCMV-HA-VP3,将表达载体转染进HEK293、BHK21及HeLa这三种不同细胞中,利用RT-PCR进行基因表达情况检测,采用Western-blotting和IFA对融合蛋白在这三种不同细胞中的表达及定位情况进行分析.结果 显示,成功构建了衣壳蛋白VP3的真核表达载体pCMV-HA-VP3,并且实现了VP3和HA标签在三种细胞中的融合表达,其在HEK293细胞中表达量最高,其次为BHK21细胞,表达量最低的是HeLa细胞.结果 表明,表达的VP3蛋白具有抗原性,且在细胞膜、细胞浆和细胞核中均有分布,为深入研究衣壳蛋白VP3的功能及在EMCV感染过程中筛选与宿主细胞互作的蛋白夯实了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	冯若飞		58	179	6.0	10.0
2	李倩		17	10	2.0	2.0
3	李向茸		14	12	1.0	3.0
4	王兴陇		4	0	0.0	0.0
5	马瑞仙		3	0	0.0	0.0
6	李生军		2	0	0.0	0.0