IL28RA真核表达载体的构建和对HaCaT细胞迁移能力的影响

• 作者: 尹雪莉 张学军 张胜权
• 来源期刊: 安徽医科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: IL28RA 基因重组 HaCaT 迁移
• 年，卷（期）: 2019,（11）
• 所属期刊栏目: 基础医学研究
• 页码范围: 1776-1779
• 页数: 4页
• 分类号: R758.63
• 字数: 3299字
• 语种: 中文
• DOI: 10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2019.11.023

摘要

目的 构建白介素28受体α(IL28RA)基因的真核表达载体,并转染HaCaT细胞,观察该基因对HaCaT细胞迁移能力的影响.方法 从HepG2细胞中提取总RNA,逆转录后以其cDNA为模板PCR扩增IL28RA编码片段.将其插入质粒pCMV6构建pCMV6-IL28RA重组表达体;重组体经酶切分析及测序鉴定,将其转染至HaCaT细胞中,经G418筛选出稳定过表达IL28RA细胞株.为检测转染效率,反转录实时荧光定量多聚核苷酸链式反应(RT-qPCR)分析转染细胞中IL28RA mRNA相对表达水平.伤口愈合实验检测过表达IL28RA对HaCaT细胞迁移能力的影响.结果 IL28RA基因成功构建并在HaCaT中表达,RT-qPCR检测转染效率显示与对照细胞相比,过表达细胞中IL28RA mRNA相对表达水平显著升高.细胞伤口愈合实验检测显示与对照细胞相比,IL28RA过表达抑制HaCaT细胞迁移能力.结论 IL28RA基因过表达降低HaCaT细胞迁移能力.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张学军	安徽医科大学第一附属医院皮肤科	227	1788	22.0	35.0
2	张胜权	安徽医科大学生物化学与分子生物学教研室	64	295	8.0	14.0
3	尹雪莉	安徽医科大学第一附属医院皮肤科	7	13	2.0	3.0