NMHC-ⅡA蛋白的重组表达、多克隆抗体制备及其功能的初步探讨

• 作者: 张华 张秀明 杜勇 武薇 熊丹 莫红梅
• 来源期刊: 国际检验医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: EB病毒 非肌肉肌球蛋白重链ⅡA 多克隆抗体 免疫特异性
• 年，卷（期）: 2019,（11）
• 所属期刊栏目: 论著·基础研究
• 页码范围: 1281-1285,1292
• 页数: 6页
• 分类号: R392.11
• 字数: 5760字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-4130.2019.11.001

摘要

目的 对人源非肌肉肌球蛋白重链ⅡA(NMHC-ⅡA)蛋白进行重组表达、纯化并制备其多克隆抗体,初步探讨其生物学功能.方法 将MYH9编码基因克隆于原核表达载体pGEX-4T-1,IPTG诱导重组表达.以谷胱甘肽琼脂糖凝胶珠纯化产物为免疫原制备兔抗NMHC-ⅡA多克隆抗体,经十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析和免疫印迹(Western-blot)检测抗体特异性;采用酶联免疫吸附法(ELISA)对纯化抗体的活性进行评价;采用抗体阻断试验进一步证实NMHC-ⅡA在EB病毒(EBV)感染鼻咽上皮细胞中的作用.结果 本研究生产和纯化两株多克隆NMHC-ⅡA抗体的浓度分别是600 μg/mL和1.35 mg/mL.制备的NMHC-ⅡA多克隆抗体以剂量依赖性的方式抑制EB病毒感染上皮细胞.结论 本研究成功实现NMHC-ⅡA的重组表达、抗体制备,实现了对其功能的初步研究,为其在鼻咽癌的发生发展过程中进一步深入研究奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张华	中山大学附属肿瘤医院实验研究部	48	502	12.0	21.0
2	杜勇	中山大学附属肿瘤医院实验研究部	6	27	2.0	5.0
3	张秀明	深圳大学第三附属医院医学检验科	3	0	0.0	0.0
4	武薇	深圳大学第三附属医院医学检验科	1	0	0.0	0.0
5	莫红梅	深圳大学第三附属医院医学检验科	1	0	0.0	0.0