波形蛋白过表达质粒pcDNA3.1b-Vim的构建及鉴定

• 作者: 施倩雯 王凯旋 邵晓婷
• 来源期刊: 齐齐哈尔医学院学报
• 学科: 医学
• 关键词: 波形蛋白 pcDNA3.1b 质粒
• 年，卷（期）: 2019,（12）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1453-1455
• 页数: 3页
• 分类号: R346
• 字数: 1914字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-1256.2019.12.001

摘要

目的 以波形蛋白(vimentin)基因为靶基因,构建波形蛋白过表达质粒pcDNA3.1b-Vim.方法 在PC12H细胞中抽提RNA,进行逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR),得到cDNA,设计引物将目的基因扩增并进行胶回收,将空载质粒pcDNA3.1b与目的基因片段进行双酶切(分别为EcoRI/XbaI)、连接,构建重组过表达质粒,转化到Top10感受态细胞,经氨苄青霉素筛选挑取阳性克隆,扩大培养,提取质粒,凝胶电泳鉴定并进行测序分析.结果 凝胶电泳鉴定及DNA测序分析显示重组质粒pcDNA3.1b-Vim构建成功.结论 成功构建波形蛋白过表达质粒pcDNA3.1b-Vim,为研究波形蛋白的生物学功能打下基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王凯旋	金华市中心医院小儿内科	12	32	4.0	5.0
2	邵晓婷	金华市中心医院小儿内科	3	10	1.0	3.0
3	施倩雯	金华市中心医院小儿内科	2	0	0.0	0.0