实时荧光定量PCR快速检测细菌对抗菌素敏感性与耐药性表型的方法建立

• 作者: 向瑶 杨朝国 谢思露
• 来源期刊: 现代预防医学
• 学科: 医学
• 关键词: 实时荧光定量聚合酶链反应 细菌 16S rRNA基因 抗菌素 敏感性
• 年，卷（期）: 2019,（9）
• 所属期刊栏目: 实验技术及其应用
• 页码范围: 1684-1688
• 页数: 5页
• 分类号: R115
• 语种: 中文

摘要

目的 建立快速检测细菌对抗菌素的敏感性与耐药性表型的实时荧光定量PCR(qPCR)方法.方法 用基于细菌16S rRNA基因通用引物和通用探针的qPCR检测大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌和铜绿假单胞菌临床分离菌株基因组DNA,绘制生长曲线以确定细菌显著生长的最短培养时间.计算细菌在含和不含抗菌素的M-H肉汤中的相对生长率,以VⅡEK 2 Compact全自动细菌分析系统的药敏结果为金标准,对细菌相对生长率进行ROC曲线分析,确定区分细菌对抗菌素敏感与耐药的相对生长率分界值.用20株肠杆菌科细菌和10株革兰阳性球菌临床分离菌株验证方法的可靠性.结果 细菌显著生长的最短培养时间为3小时.区分大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌和铜绿假单胞菌对抗菌素敏感与耐药的相对生长率分界值分别为0.44、0.40和0.48本方法检测30株大肠埃希菌对3种抗菌素的敏感性和耐药性的准确度分别为98.4％和100.0％,30株金黄色葡萄球菌对3种抗菌素的敏感性和耐药性的准确度均为100.0％,30株铜绿假单胞菌对3种抗菌素敏感性和耐药性的准确度分别为60.0％和64.0％.20株肠杆菌科细菌和10株革兰阳性球菌对抗菌素的敏感性与耐药性结果的总准确度分别为92.7％和93.3％.结论 本方法能快速准确为临床提供肠杆菌科细菌和革兰阳性球菌对抗菌素的敏感性与耐药性表型,但对非发酵菌药敏结果的准确性不能满足临床要求.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杨朝国		24	45	3.0	6.0
2	向瑶		5	22	2.0	4.0
3	谢思露		4	3	1.0	1.0