发酵豆乳主要乳酸菌实时荧光定量PCR检测方法的建立

• 作者: 于寒松 任大勇 冯时荣 孙畅 安彬 杨柳 王国超 王玉华
• 来源期刊: 大豆科学
• 关键词: 发酵豆乳 植物乳杆菌 副干酪乳杆菌 实时荧光定量PCR
• 年，卷（期）: 2020,（3）
• 所属期刊栏目: 分析加工
• 页码范围: 464-471
• 页数: 8页
• 语种: 中文
• DOI: 10.11861/j.issn.1000-9841.2020.03.0464

摘要

为快速检测发酵豆乳中主要乳酸菌植物乳杆菌、副干酪乳杆菌含量,建立实时荧光定量聚合酶链式反应检测方法.根据植物乳杆菌、副干酪乳杆菌保守区域设计特异性引物和探针,验证建立的实时荧光定量PCR法的特异性、灵敏度和重复性,并与国标法进行比较.结果 表明:引物特异性强,实时荧光定量PCR法特异性及重复性较好;植物乳杆菌和副干酪乳杆菌的检验灵敏度分别达到1.3×10-4和1.0×10-5 ng·μL-1.分别建立植物乳杆菌和副干酪乳杆菌标准菌株的实时荧光定量PCR检验法的标准曲线,得出R2分别为0.994 3和0.999 6,表明线性关系较好,可进行发酵豆乳中2种菌株含量的检测,测得供试发酵豆乳中植物乳杆菌与副干酪乳杆菌比例为4∶1.实时荧光定量PCR法测得发酵豆乳中乳酸菌总量为(5.5 ±0.26)×109 CFU·mL-1,国标法检测为(5.3±0.43)×109 CFU·mL-1,2种方法检测结果无差异(P＞0.05),表明建立的实时荧光定量PCR方法可快速、准确地检测出发酵豆乳中植物乳杆菌和副干酪乳杆菌的含量.