梭梭HabHLH74转录因子基因的克隆及在大肠杆菌中的表达

• 作者: 何江峰 刘红葵 房永雨 王力伟 王朝 王蕴华 赵沛义 郭慧琴
• 来源期刊: 畜牧与饲料科学
• 学科: 生物学
• 关键词: 梭梭 HabHLH74转录因子 克隆 原核表达
• 年，卷（期）: 2020,（5）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 13-18
• 页数: 6页
• 分类号: Q943.2
• 语种: 中文
• DOI: 10.12160/j.issn.1672-5190.2020.05.003

摘要

利用分子生物学技术从梭梭中克隆了HabHLH74转录因子基因,在大肠杆菌中表达HabHLH74蛋白,旨在为梭梭抗逆分子机理提供研究基础.研究结果表明:①利用RT-PCR技术成功扩增了HabHLH74的完整编码区cDNA序列,HabHLH74编码区cDNA序列长度为1 218 bp.根据HabHLH74编码区序列预测出其编码蛋白的理化性质.②成功构建了HabHLH74基因的原核表达载体pET28a(+)-HabHLH74,并在大肠杆菌中成功表达了梭梭HabHLH74蛋白,其分子量为43.6 kDa.③对诱导条件进行单因素试验后获得的最佳诱导表达条件:诱导剂IPTG浓度为0.5 mmol/L,诱导温度为37℃,诱导时间为6h.④对在优化条件下诱导后的菌体进行超声破碎后发现梭梭HabHLH74蛋白主要以包涵体形式存在;降低诱导温度(16℃、25℃诱导)未能得到可溶性表达的梭梭HabHLH74蛋白.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	赵沛义		46	863	16.0	28.0
2	郭慧琴		33	263	10.0	15.0
3	房永雨		15	62	6.0	7.0
4	王蕴华		8	96	3.0	8.0
5	刘红葵		32	74	4.0	7.0
6	王力伟		2	1	1.0	1.0
7	何江峰		14	125	7.0	11.0
8	王朝		2	0	0.0	0.0