鼠抗猪圆环病毒2型"ORF7"多克隆抗体的制备及应用

• 作者: 冯全文 孙颖 李鑫鑫 王凯 田昊伦 范志新 郭抗抗 高登科
• 来源期刊: 动物医学进展
• 学科: 农学
• 关键词: 猪圆环病毒2型 ORF7蛋白 多克隆抗体 免疫印迹试验 间接免疫荧光试验
• 年，卷（期）: 2020,（8）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 15-22
• 页数: 8页
• 分类号: S851.33|S858.28
• 字数: 6299字
• 语种: 中文

摘要

为深入研究新鉴定的"ORF7"蛋白在猪圆环病毒2型(PCV2)感染中的作用,制备了鼠抗ORF7蛋白的多克隆抗体并进行初步应用.首先,克隆ORF7基因,分别构建了重组原核表达质粒pGEX-6p-1-ORF7和重组真核表达质粒pCDH-CMV-Flag-ORF7.将pGEX-6p-1-ORF7进行诱导表达,确定在IPTG 0.8 mmol/L、37℃下诱导12 h表达量最高,且以包涵体形式表达,分子质量大小约为44 ku.将目的蛋白纯化后免疫Balb/c小鼠,第4次免疫后收集小鼠血清,ELISA方法检测其抗体效价为1:10000,可用于免疫印迹试验检测pGEX-6p-1-ORF7表达的重组蛋白.应用获得的多克隆抗体通过IFA检测PCV2感染的PK-15细胞中ORF7蛋白的表达,Western blot检测pCDH-CMV-Flag-ORF7和pEGFP-N1-ORF2蛋白的表达,结果表明制备的多克隆抗体可用于IFA和Western blot检测ORF7蛋白.研究结果为探究ORF7在PCV2感染中的作用提供了基础材料.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	郭抗抗	西北农林科技大学动物医学院	109	484	12.0	16.0
2	王凯	西北农林科技大学动物医学院	17	66	5.0	7.0
3	范志新	西北农林科技大学动物医学院	2	8	1.0	2.0
4	高登科	西北农林科技大学动物医学院	4	0	0.0	0.0
5	李鑫鑫	西北农林科技大学动物医学院	5	2	1.0	1.0
6	孙颖	西北农林科技大学动物医学院	3	44	2.0	3.0
7	冯全文	西北农林科技大学动物医学院	2	8	1.0	2.0
8	田昊伦	西北农林科技大学动物医学院	2	8	1.0	2.0