黑头软口鲦上皮瘤细胞ifn-1基因的表达及抗病毒活性

• 作者: 孙杰 戴彩姣 李莉娟 袁军法 郭雅娜 陈孝煊
• 来源期刊: 水产学报
• 学科: 农学
• 关键词: 黑头软口鲦 ifn-1 上皮瘤细胞 鲤春病毒血症病毒 原核表达
• 年，卷（期）: 2020,（9）
• 页码范围: 1448-1456
• 页数: 9页
• 分类号: Q786|S941.41
• 语种: 中文
• DOI: 10.11964/jfc.20190611855

摘要

为了体外表达黑头软口鲦上皮瘤细胞(EPC)I型干扰素(IFN-1),本实验通过RT-PCR从EPC中扩增ifn-1基因,构建重组表达质粒pET-32a-IFN-1,并转化到感受态细胞Transetta(DE3),体外纯化后检测其抗病毒活性.结果 显示,ifn-1编码区大小为552 bp,编码184个氨基酸,与草鱼干扰素1(CiIFN1)亲缘关系最近.通过SDS-PAGE分析,重组表达质粒pET-32a-IFN-1在宿主菌中可明显表达约35 ku的融合蛋白条带,且部分呈可溶性表达,进而通过亲和纯化可溶性重组IFN-1(rIFN-1),免疫新西兰大白兔获得效价较高的抗IFN-1多克隆抗体,可用于检测细胞内源性的IFN-1.定量PCR显示rIFN-1与EPC细胞孵育可以诱导抗病毒蛋白Mx1的表达,并抑制鲤春病毒血症病毒(SVCV)引起的细胞病变(CPE)及SVCV的复制,表明rIFN-1具有抗病毒活性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈孝煊		72	1384	20.0	34.0
2	李莉娟		13	50	3.0	7.0
3	袁军法		17	85	4.0	9.0
4	孙杰		1	0	0.0	0.0
5	郭雅娜		1	0	0.0	0.0
6	戴彩姣		1	0	0.0	0.0