猫白介素18基因的克隆、表达及其产物的生物学活性分析

• 作者: 姜艳平 崔文 徐义刚 李一经 李华 汉武娇 潘荣辉 牛超
• 来源期刊: 中国预防兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 猫白介素18 可溶性表达 生物活性
• 年，卷（期）: 2020,（6）
• 所属期刊栏目: 免疫学
• 页码范围: 612-616
• 页数: 5页
• 分类号: S852.4
• 字数: 3874字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1008-0589.201909016

摘要

白介素18(IL-18)可以诱导IFN-γ分泌,促进T、B淋巴细胞的增殖分化,具有良好的抗病毒活性.为探究猫IL-18的生物学活性,本研究采用水泡性口炎病毒(VSV)联合poly I:C共同刺激实验猫,采用常规方法分离猫脾淋巴细胞,提取总RNA,经RT-PCR方法获得大小为579 bp的猫IL-18基因.构建了可溶性表达猫IL-18的重组大肠杆菌pCold-IL-18/BL21,经IPTG诱导,SDS-PAGE分析结果显示,重组菌表达了约70 ku的重组蛋白.重组蛋白经3C蛋白酶处理后并通过Ni柱亲和纯化,获得了可溶性表达的重组猫IL-18(rIL-18).取BALB/c小鼠和猫的脾淋巴细胞,经不同浓度rIL-18刺激,采用MTT法检测rIL-18促进淋巴细胞增殖活性,结果显示可溶性表达的rIL-18能够有效地促进淋巴细胞增殖;采用细胞病变抑制法检测rIL-18协同干扰素的抗病毒效果,结果显示rIL-18联合临床用干扰素可显著增强抗病毒效果.本研究为治疗猫病毒性疾病奠定了物质基础.