铜绿假单胞菌LAMP快速检测方法建立及微滴数字PCR验证

• 作者: 张德荣3* 李羽翠2 李羽翡1 祖新1
• 来源期刊: 食品工业科技
• 学科: 工学
• 关键词: 铜绿假单胞菌 环介导等温扩增 快速检测 微滴数字PCR
• 年，卷（期）: 2020,（11）
• 所属期刊栏目: 分析检测
• 页码范围: 267-272,293
• 页数: 7页
• 分类号: TS207.3
• 字数: 4825字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13386/j.issn1002-0306.2020.11.041

摘要

目的:采用环介导等温扩增技术建立铜绿假单胞菌快速检测方法,并用微滴式数字聚合酶链式反应(droplet digital polymerase chain reaction,ddPCR)技术进行方法验证.方法:以铜绿假单胞菌rpod基因为靶基因设计引物,建立了果汁饮品铜绿假单胞菌快速检测方法,对于方法的可靠性、特异性和灵敏度,采用ddPCR验证.结果:本实验建立的LAMP快速检测方法显色结果明显,ddPCR检测,以铜绿假单胞菌悬液浓度为横坐标,以数字PCR扩增copy数为纵坐标,生成标准曲线y =0.07497x-9.3516,线性关系良好,R2=0.9999.铜绿假单胞菌检测范围1.5×102～1.5×105 CFU/mL;方法灵敏度高、特异性强,标准菌株最低浓度为1 ng/μL;标准差分别为0.57、0.71、4.24、14.8,RSD值在0.66％ ～22.8％之间.检测果汁饮品128份,126份未显色,显色样品2份,以标准曲线定值,浓度分别为1.64×104、2.29×102 CFU/mL.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李羽翡1		1	0	0.0	0.0
2	祖新1		1	0	0.0	0.0
3	李羽翠2		1	0	0.0	0.0
4	张德荣3*	西北民族大学生物医学研究中心	1	0	0.0	0.0