禽蛋黄过敏原Gal d 6的重组表达、纯化鉴定

• 作者: 刘运德 崔亚琼 张嘉懿 李会强 李军普 李柳栩 鲍会静 黄伦辉
• 来源期刊: 食品工业科技
• 学科: 工学
• 关键词: rGal d 6 重组表达 禽蛋黄过敏 特异性IgE
• 年，卷（期）: 2020,（13）
• 所属期刊栏目: 生物工程
• 页码范围: 118-121,127
• 页数: 5页
• 分类号: TS201.3
• 字数: 4208字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13386/j.issn1002-0306.2020.13.019

摘要

目的:建立表达蛋黄Gal d 6重组蛋白工程菌,并鉴定重组Gal d6蛋白免疫活性.方法:直接合成Gal d 6DNA,与pET-28a构建重组质粒,转化E.coli BL21经IPTG诱导表达;优化表达条件制备重组Gald6蛋白,经镍离子亲和层析柱纯化得到纯品蛋白;纯化Gal d6蛋白经间接ELISA及western blot鉴定Gal d6蛋白免疫活性.结果:经DNA测序、SDS-PAGE、禽蛋过敏血清鉴定表达Gal d 6蛋白具有免疫活性,经镍柱亲和层析获得单一条带.该工程菌最佳表达条件为37℃,0.5 mmol/L IPTG,2h,收获量每升菌液可收获重组蛋白约9.1 mg.重组蛋白与禽蛋过敏血清具有良好反应性.结论:建立稳定表达具有免疫活性的Gal d 6蛋白的工程菌株.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李会强	天津医科大学医学检验学院	91	673	13.0	22.0
2	刘运德	天津医科大学医学检验学院	80	394	11.0	17.0
3	张嘉懿	天津市儿童医院检验科	8	26	3.0	5.0
4	李军普	天津医科大学医学检验学院	5	0	0.0	0.0
5	崔亚琼	天津医科大学医学检验学院	4	0	0.0	0.0
6	黄伦辉	天津医科大学医学检验学院	2	0	0.0	0.0
7	鲍会静	天津市南开医院医学诊断实验室	3	0	0.0	0.0
8	李柳栩	天津医科大学医学检验学院	2	0	0.0	0.0