小麦miR5062靶基因的鉴定及功能研究

• 作者: 刘涛 吴保为 李志杰 刘振兰 王倩 赵惠贤
• 来源期刊: 麦类作物学报
• 关键词: 小麦 tae-miR5062 靶基因 基因功能
• 年，卷（期）: 2021,（1）
• 所属期刊栏目: 遗传育种|Genetics & Breeding
• 页码范围: 1-10
• 页数: 10页
• 分类号: S512.1|S330
• 语种: 中文
• DOI: 10.7606/j.issn.1009-1041.2021.01.01

摘要

miRNA作为一种植物中重要的内源小分子,通过调控靶基因的表达来行使其功能.为了探索小麦(Triticum aestivum)中新发现的miRNA tae-miR5062的靶基因,利用生物信息学方法对tae-miR5062的靶基因进行预测和进一步分析,将属于小麦AGO2家族的TaAGO2确定为其靶基因;进一步构建重组表达载体pBI121-pre-miR5062和pBI121-TaAGO2,分别转入农杆菌GV3101感受态细胞,然后在烟草叶片上分区注射进行农杆菌介导的烟草瞬时共转化实验.结果 表明,tae-miR5062与其靶基因TaAGO2互作降解,并降低了TaAGO2的表达.利用实时定量PCR方法检测TaA GO2在小麦不同组织中的转录水平,结果显示,TaAGO2在小麦根和叶中表达量不高,但在旗叶、茎、穗、籽粒和生长点中都有较高的表达.将C端连有GFP的TaAGO2融合表达载体转入水稻黄化苗叶鞘的原生质体后瞬时表达的亚细胞定位结果显示,TaAGO2蛋白定位于细胞核和细胞质中;与拟南芥过量表达TaAGO2的转基因植株相比,野生型对照并无明显的表型.