微嗜酸寡养单胞菌中的漆酶对黄曲霉毒素B1降解脱毒的生物活性

• 作者: 姜宏 杜郑君 钱莺莺 陈楠 蔡梦宇 费晴如 陈静静 周育
• 来源期刊: 微生物学报
• 关键词: 解毒 漆酶 黄曲霉毒素B1 降解基因 突变菌株
• 年，卷（期）: 2021,（1）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 127-140
• 页数: 14页
• 语种: 中文
• DOI: 10.13343/j.cnki.wsxb.20200122

摘要

[目的]探究微嗜酸寡养单胞菌中的漆酶对AFB1的降解活性,并确定漆酶在菌株CW117降解代谢AFB1过程中的贡献.[方法]从微嗜酸寡养单胞菌基因组中,共筛选到两个漆酶基因lc1和lc2,并用大肠杆菌BL21外源表达蛋白rLC1和rLC2,在体外检测其对AFB1的降解活性.同时参考前人报道,研究了氧化性辅剂对漆酶AFB1降解的促进作用.在体外实验基础上,利用自杀质粒pK18mobsacB,以同源重组方法构建了两株漆酶缺失株CW117△lc1和CW117△lc1-lc2,验证了漆酶基因（lc1i和lc2)对AFB1体内降解作用.[结果]体外实验显示,重组酶rLC1具有AFB1降解活性,氧化性辅剂ABTS、AS或SA可显著地提高rLC1降解活性,但rLC2未显示降解活性.突变株CW117△lc1和CW117△lc1-lc2对AFB1仍显示了较高的降解活性,且在大多数降解时间点与野生株CW117无显著差异.[结论]微嗜酸寡养单胞菌CW117菌株中,LC1在体外显示了AFB1的降解活性,且降解活性可以被氧化性辅助因子增强,LC2未显示体外降解活性;体内试验发现,漆酶基因lc1和lc2对菌株CW117降解AFB1的贡献较小,该菌株还存在其他降解途径.