单核细胞增生李斯特菌膜囊泡的制备及生物活性

• 作者: 杨丽玉 杨诗怡 林巍 刘赛南 罗勤
• 来源期刊: 微生物学通报
• 关键词: 单核细胞增生李斯特菌 膜囊泡 生物活性 致病性
• 年，卷（期）: 2021,（1）
• 所属期刊栏目: 医学微生物学
• 页码范围: 145-155
• 页数: 11页
• 语种: 中文
• DOI: 10.13344/j.microbiol.china.200436

摘要

[背景]细胞外囊泡(Extracellular Vesicles,EVs)是一种在自然界中普遍存在的包含生物学活性物质的囊泡状结构,其中包括革兰氏阳性菌分泌的膜囊泡(MembraneVesicles,MVs).近年来,单核细胞增生李斯特菌(Listeriamonocytogenes,Lm)作为一种能产MVs的革兰氏阳性致病菌引起了众多科研人员的关注,尽管如此,对其MVs的了解仍然有限.[目的]建立健全Lm-MVs制备方法,同时深入了解其生物活性.[方法]以Lm野生菌株EGDe及其毒力突变株(EGDe△prfA、EGDe△prfA+pERL3-prfA*)为研究对象,利用超滤浓缩法和Optiprep密度梯度离心法提取Lm的MVs,并对这两种提取MVs的方法进行比较.此外,通过检测不同MVs对菌株生物被膜的影响,以及不同MVs的溶血活性和对棉铃虫的感染毒性来探究MVs的生物活性.[结果]相较于超滤浓缩法,Optiprep密度梯度离心法提取的Lm-MVs产率高、电镜观测效果好,但该方法操作相对复杂,耗时较长;不同毒力的Lm均可向外分泌直径20-200 nm的MVs,而且MVs的形态结构与菌株的毒力无明显关系;但MVs可以影响菌株生物被膜的形成,具有一定的溶血活性,并能导致棉铃虫幼虫死亡或者降低其存活率和化蛹率,而且其毒性与菌株本身毒性正相关.[结论]Lm分泌的MVs极有可能直接参与了Lm对宿主的致病,并在细菌-细菌之间以及细菌-宿主相互作用中扮演了重要角色.研究结果将对进一步研究革兰氏阳性菌MVs的形成和功能以及Lm的致病机制具有重要意义.