市售普洱茶中真菌群落构成和物种多样性分析方法研究

• 作者: 王学硕 赵琳娜 刘娜 王亚萍 崔生辉
• 来源期刊: 中国食品卫生杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 普洱茶 真菌 物种多样性
• 年，卷（期）: 2021,（6）
• 所属期刊栏目: 实验技术与方法|Experimental Technique and Method
• 页码范围: 777-782
• 页数: 6页
• 分类号: R155
• 语种: 中文
• DOI: 10.13590/j.cjfh.2021.06.024

摘要

目的 综合应用传统分离培养、内部转录间隔区(ITS)测序和高通量基因组学测序技术,建立分析市售普洱茶中真菌群落构成和物种多样性的新方法.方法 按照GB 4789.15-2016《食品安全国家标准食品微生物学检验霉菌和酵母计数》对普洱茶样本进行可培养真菌检测和分离纯化,对分离到的菌株进行ITS测序并在NCBI数据库中进行Blast分析;采用十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)法提取普洱茶样本中真菌基因组DNA,进行聚合酶链式反应(PCR)扩增和扩增子测序,并对高通量测序数据进行OTUs聚类,开展物种构成及多样性分析.结果 通过传统分离培养方法获得12株真菌,主要为曲霉和毛霉,其中黑曲霉占比最高(25.00％,3/12).基因组学的物种分布结果显示,普洱茶样本中的真菌物种多样性和均匀度较低,存在数量占比较高的优势物种;占比最高的为子囊菌门(74.03％),属的水平上以芽生葡萄孢酵母属为主(49.43％),曲霉属占比较低(14.04％).结论 本研究综合应用传统分离培养、ITS测序和高通量基因组学测序技术,构建了普洱茶中真菌群落构成和物种多样性分析的新方法,为普洱茶中微生物群落构成及其对品质和安全性影响的进一步研究提供了思路和参考.