M2e与Qβ融合原核表达载体的构建与初步评价

• 作者: 荆新蕊 邢体坤 宋路萍 杨振苹 王亚萍 刘伟 宋彦君 张静静
• 来源期刊: 中国当代医药
• 关键词: M2e蛋白 类病毒颗粒 Qβ颗粒蛋白 原核表达系统 流式细胞术 免疫组化
• 年，卷（期）: 2021,（15）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 8-11,封3
• 页数: 5页
• 分类号: R392
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-4721.2021.15.004

摘要

目的 构建流感病毒M2基因(M2e)与Qβ的重组原核表达载体,并对Qβ-M2e病毒颗粒子(VLPs)进行免疫学评价,为预防性疫苗的研制打下基础.方法 通过分子生物学手段,将M2e同Qβ质粒载体连接构建重组原核表达载体,经酶切、测序鉴定后,将重组质粒转化大肠杆菌BL21中,密度梯度离心回收并纯化其表达产物Qβ-M2e.动物免疫后通过免疫组化、流式细胞术检测生发中心(GC)B细胞的增殖情况.结果 酶切、测序结果均与预期结果相符,电镜下观察到重组蛋白为颗粒性蛋白.免疫动物后,GC B细胞增殖明显.结论 成功构建了Qβ-M2e原核表达载体,并对表达的Qβ-M2e病毒颗粒进行了初步细胞学评价.该载体可作为流感病毒VLP疫苗的候选载体疫苗,为深入研究通用流感疫苗提供了资料.