淡豆豉炮制中黄曲霉毒素产毒株的筛选鉴定和产毒能力测定

• 作者: 李春玲 贺婧 王立元 李翠英 龙凯 翁美芝 冯驰 谢小梅
• 来源期刊: 中草药
• 学科: 医学
• 关键词: 淡豆豉 炮制过程 黄曲霉毒素 产毒能力 超高效液相色谱-串联质谱技术 黄曲霉 溜曲霉
• 年，卷（期）: 2022,（5）
• 所属期刊栏目: 药剂与工艺|Pharmaceutics and Technology
• 页码范围: 1411-1417
• 页数: 7页
• 分类号: R283.6
• 语种: 中文
• DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2022.05.016

摘要

目的 对淡豆豉炮制过程中产黄曲霉毒素(aflatoxins,AFTs)的微生物(简称产毒菌)进行筛选鉴定、定量分析和产毒能力测定.方法 运用紫外荧光法初筛淡豆豉炮制中各样本的产毒菌并菌落计数;对初筛菌株的18S rDNA序列进行PCR扩增、测序,测序结果经NCBI同源性比对、MEGA7.0软件构建系统发育树进行分子生物学鉴定;应用超高效液相色谱-串联质谱法(ultra performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry,UPLC-MS/MS)检测各产毒菌培养液中AFTs含量,确定各产毒菌的产毒能力.结果 紫外荧光法结合分子生物学共筛选鉴定出15株产毒菌株,为黄曲霉和溜曲霉;"黄衣上遍"阶段产毒菌菌落数逐渐增多,至发酵第6天时最多,为1X106.30CFU/g,进入"再闷"阶段产毒菌数量逐渐减少,从再闷第9天开始至第15天均未检测到产毒菌;经UPLC-MS/MS法确定15株菌中有5株不产毒,10株产毒,且产毒能力各不相同并均低于5 ng/mL,远低于黄曲霉标准株(654.90 ng/mL).结论 淡豆豉炮制过程中存在产AFTs能力不同的黄曲霉、溜曲霉且产毒菌数量呈现先升后降,将为探讨淡豆豉炮制中AFTs消长机制奠定基础,并首次从安全性角度证实了淡豆豉"再闷"的重要性和"再闷"时间的合理性.