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刊名：食品工业科技
发表时间：2013-10-01
摘要:
利用L-1-磷酸鼠李树胶糖醛缩酶(RhaD)以较低成本同时合成稀有糖D-山梨糖和D-阿洛酮糖.为避免直接使用价格昂贵且不稳定的底物磷酸二羟基丙酮(DHAP),以便宜的底物DL-3-磷酸甘油作为前体,采用基于RhaD和磷酸酶(AP或YqaB)的“一锅四酶法”对D-山梨糖和D-阿洛酮糖的合成进行了优化.产物D-山梨糖和D-阿洛酮糖用TLC、HPLC进行检测,并分别采用硅胶、P-2凝胶、Ca2+离子交换树脂对产物进行纯化以及1H NMR对产物进行鉴定.结果表明“一锅四酶法”以及分离纯化方法可高效地应用于D-山梨糖和D-阿洛酮糖的实际生产.该方法的建立将为其他稀有糖及其衍生物的合成提供理论依据.
刊名：中国食品添加剂
发表时间：2014-08-01
摘要:
稀有糖是指在自然界中存在但含量极少的一类单糖及糖醇、环醇、去氧糖、氨基糖、分支碳链糖等衍生物,在膳食、医疗、保健、等领域中有着重要的作用和巨大的市场潜力.综述了稀有单糖及相应糖醇的C-2差向异构化、C-3差向异构化、氧化还原、糖的递增/递降反应等合成途径.详细阐述了以D-塔格糖3-差向异构酶(DTE)为核心,结合醛糖还原酶、醛糖异构酶、多元醇脱氢酶(polyol dehydrogenase,PDH),进行所有同碳糖及相应糖醇之间的相互转化的Izumoring生物合成策略.在此基础上结合碳的递增反应(Kiliani氰化增碳法)、碳的递降反应(Wohl递降法、Ruff递降法)等生化合成方法,初步形成了丁糖、戊糖、己糖及相应糖醇之间的相关转化策略.阐述了稀有单糖及相应糖醇合成策略的研究意义,并对稀有糖合成的研究趋势进行了展望.
刊名：食品与发酵工业
发表时间：2018-07-01
摘要:
稀有糖D-阿洛酮糖在食品、医药、保健等领域显示了巨大的应用潜能,然而以较高的收率大量生产D-阿洛酮糖依然面临着挑战.前期研究表明,属于磷酸二羟基丙酮(dihydroxyacetone phosphate,DHAP)依赖型醛缩酶家族的L-鼠李树胶糖-1-磷酸醛缩酶(RhaD)在以D-甘油醛为醛受体时,失去了对该醛受体的立体选择性,生成D-阿洛酮糖和D-山梨糖两种稀有糖,两者比例接近1∶1.为了对RhaD醛缩酶的立体选择性进行优化使其专一性地生产D-阿洛酮糖,对RhaD醛缩酶的152位酪氨酸进行了19种其他氨基酸的定点饱和突变,发现RhaDY152A突变体倾向于生成D-阿洛酮糖,D-阿洛酮糖和D-山梨糖的比例从最初的1∶1显著提高到8∶1,为下一步对RhaD醛缩酶分子改造进而定向合成单一产物D-阿洛酮糖提供理论依据.
刊名：生物产业技术
发表时间：2018-06-01
摘要:
稀有糖是一类在自然界中存在但含量很低、同时具有重要生理功能的一类单糖及其衍生物,在膳食、保健、医药等领域中发挥着重要的作用.此外稀有糖还可以作为多种天然产物和药物的合成前体.然而稀有糖的合成成本较高,大大制约了其广泛应用.当前利用微生物和酶转化法合成稀有糖成为一种强有利的工具.综述了生物法合成稀有己酮糖(包括D-塔格糖、D-山梨糖、D-阿洛酮糖、L-塔格糖、L-果糖、L-山梨糖和1-脱氧-L-果糖等)的研究进展,探讨了稀有己酮糖合成策略的研究趋势.
刊名：食品与发酵工业
发表时间：2017-06-01
摘要:
旨在建立1种酿酒酵母孢子表面展示系统,并将其应用于稀有糖合成.表面展示系统是运用微生物自身功能把外源蛋白或多肽展示在细胞表面,文中用磷酸甘油氧化酶(GPO)来验证酿酒酵母孢子表面展示系统的可行性.将编码肺炎链球菌来源的GPO的基因glpo与信号肽序列(ss)融合后连接到载体pRS42 4-TE Fpr上,将重组质粒pR S42 4-TEFpr-ss-glpo转化至酿酒酵母野生型及缺陷型菌株中并进行产孢,通过荧光观察、western blot分析以及酶活测定,表明酿酒酵母缺陷型孢子可以实现蛋白的表面展示.通过对GPO孢子表征,表明GPO孢子在pH为7.0、温度为30℃时活性最高,该孢子作为催化剂可以重复使用,当使用第3次时,活性可达最大活性的40％.最后将GPO孢子应用于“一锅四酶法”进行稀有糖L-果糖的合成,转化率为12％.
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